暗室曝光
主要包括:单抗、多抗、抗、多抗、内参

ECL超敏型发光液

Catalog NO.:BE6706
Applications :
Reactivity :

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BE6706-100 50ml+50ml EASYBIO
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BE6706-500 250ml+250ml EASYBIO
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产品详情

ECL超敏型发光液

规格

BE6706-100            50ml+50ml

BE6706-500            250ml+250ml

 

简介

本试剂盒优化了底物组成,使用了新型高效增强剂,发光强度比传统ECL显色液提高了50-100 倍,并有效地降低了背景。试剂盒使用新的氧化剂代替不稳定的双氧水,提高了试剂盒的稳定性,室温可稳定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后,发出特定波长荧光(400-450 nm),可对 X 光胶片曝光,也可直接使用荧光 CCD 扫描,主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。

 

缓冲液用量

一抗工作浓度:0.2-1.0 µg/mL;

HRP标记二抗工作浓度:10-500 ng/mL,根据二抗效价调整;

显色液的使用比例:Solution I : Solution II = 1:1;10 cm2 转印膜使用1-2 mL工作液。

 

操作步骤

根据常规操作转印结束后,进行封闭、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步骤,根据膜的大小,按每 10cm2 膜使用 1-2mL 工作液,按比例吸取等体积溶液 I 和溶液 II 混匀,配制成发光检测工作液。用 平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体。用移液器将工作液加到转印膜上,使其均匀覆盖,室温孵育 1-2 分钟,此步骤可在洁净保鲜膜上或塑料盒中完成。

X光胶片法

1) 用平头镊子夹起转印膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体,留下少量工作液,不要让膜完全干燥。膜的蛋白面朝上,包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡,用小块透明胶带粘住四角,固定在X光片暗盒内。

2) 在暗室中取一张X 光胶片置于包裹的膜上,合上暗盒,曝光30秒至1分钟。立即定影、显影,根据曝光强度,调整下一张 X 光胶片的曝光时间。如果背景过高,可以使用两张 X
光胶片同时压片。

荧光拍照法

1) 如果需要使用CCD拍照,可以将膜放置于工作液中,开机后按照使用说明,将转印膜取出,进行拍照。

2) 可以根据背景情况,调整机器测量参数,提高信噪比。

管式化学发光法

1) 将鲁米诺的化学发光检测波长可设定在 425nm 左右,可以选择单点测量,或者取多次平均值。

2) 按照机器要求,将配制好的工作液加入到样品管中,间隔一定时间测量发光强度。

  

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