ECL增强型发光液

规格

BE6705-100            50ml+50ml

BE6705-500            250ml+250ml

简介

本试剂盒优化了底物组成，使用了新型高效增强剂，发光强度比传统ECL显色液提高了30-50 倍，并有效地降低了背景。试剂盒使用新的氧化剂代替不稳定的双氧水，提高了试剂盒的稳定性，室温可稳定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后，发出特定波长荧光（400-450 nm），可对 X 光胶片曝光，也可直接使用荧光 CCD 扫描，主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。

缓冲液用量

一抗工作浓度：0.2-1.0 µg/mL；

HRP标记二抗工作浓度：10-500 ng/mL，根据二抗效价调整；

显色液的使用比例：Solution I : Solution II = 1:1；10 cm2 转印膜使用1-2 mL工作液。

操作步骤

根据常规操作转印结束后，进行封闭、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步骤，根据膜的大小，按每 10cm2 膜使用 1-2mL 工作液，按比例吸取等体积溶液 I 和溶液 II 混匀，配制成发光检测工作液。用 平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体。用移液器将工作液加到转印膜上，使其均匀覆盖，室温孵育 1-2 分钟，此步骤可在洁净保鲜膜上或塑料盒中完成。

X光胶片法

1) 用平头镊子夹起转印膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体，留下少量工作液，不要让膜完全干燥。膜的蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡，用小块透明胶带粘住四角，固定在X光片暗盒内。

2) 在暗室中取一张X 光胶片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分钟。立即定影、显影，根据曝光强度，调整下一张 X 光胶片的曝光时间。如果背景过高，可以使用两张 X
光胶片同时压片。

荧光拍照法

1) 如果需要使用CCD拍照，可以将膜放置于工作液中，开机后按照使用说明，将转印膜取出，进行拍照。

2） 可以根据背景情况，调整机器测量参数，提高信噪比。

管式化学发光法

1) 将鲁米诺的化学发光检测波长可设定在 425nm 左右，可以选择单点测量，或者取多次平均值。

2) 按照机器要求，将配制好的工作液加入到样品管中，间隔一定时间测量发光强度。